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2018-920
许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细胞越养越好。一般的程序步骤,细节操作,我这里就不讲了,只讲一些基本操作背后的知识,如果不对之处,欢迎指正,一起讨论:1,其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要...
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2018-920
ELISA的技术要点包括三个方面:试剂的制备、反应条件的选择和操作的标准化。一、试剂的制备ELISA的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下叙述这些试剂的原料和制备方法。(一)固相载体可作ELISA中载体的物质很多,常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。在ELISA测定过程中,它作为载体和容器,不参与化学反应。加之它的价格低廉,所以被普遍采...
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2018-97
日前,英国布里斯托大学(UniversityofBristol)和AfferentPharmaceuticals公司的研究人员联合发现了一个治疗高血压的新策略。他们治疗高血压的策略不是靶向心脏或者肾脏中的常见靶点,而是将目光转向了位于颈部的颈动脉体(carotidbody)。他们的研究结果发表在一期的Nature子刊NatureMedicine上。高血压是世界上导致死亡的zui重要因素之一。*有三分之一的人患有高血压。对于40岁以上的成年人来说,舒张压每上升10毫米汞柱,因心...
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2018-97
Western,也称Westernblot、Westernblotting、Western印迹,是用抗体检测蛋白的常用的方法之一。本文分别介绍western的实验原理、实验步骤以及试剂选择指南。实验原理:Western技术是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳后,经PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第...
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2018-97
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