凝胶过滤层析（SEC）的蛋白纯化方法是怎样的呢？

凝胶过滤层析（SEC）的蛋白纯化方法是怎样的呢？凝胶过滤层析又称为分子筛或排阻层析，是利用蛋白分子大小和形状的不同进行分离。以惰性细颗粒基质作为层析柱填料，由于液体的挤压，大分子物质因无法进入细颗粒的微孔中而随着液体从细颗粒间的缝隙流出，而小分子因进入细颗粒基质内微孔运动速度慢，保留时间长，比大分子物质流出缓慢而分离。凝胶过滤的层析样品不与层析柱料结合，因此，缓冲液成分不直接影响分辨率。凝胶层析的固定相是凝胶。凝胶是一种不带电荷的具有三维空间多孔网状结构的物质，凝胶的每个颗粒...

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用Trizol法提取RNA的实验步骤

RNA是目前发现细胞内生物功能丰富多样的生物大分子，同时是DNA与蛋白质信息传递的桥梁，因此完整RNA的提取和纯化是功能基因组时代的重要手段。今天我们一起来了解一下用Trizol法提取RNA的实验步骤。以提取组织细胞为例：1.提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5~106个细胞加1mlTrizol后，反复用枪吹打或剧烈震荡以裂解细胞；2.将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中，在室温15~30℃下放置5分钟；3.在上述EP管中，按照每1mlTrizol后加0.2ml...

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细胞侵袭实验过程是怎么样呢？

细胞侵袭发生在肿瘤细胞转移的第一步，即肿瘤细胞在原位突破基底膜，那么细胞侵袭实验过程是怎么样呢？让我们一起来了解一下吧！一.基质胶包被：(a)将基质胶置于冰中并在4℃融化，使用预冷的移液管或吸头混合基质胶至均匀状态。(b)在冰上，将基质胶用无血清培养液按照1:8的比例进行稀释，例如取8µl基质胶加入64µl不含血清的培养液中，使用预冷的吸头混合至均匀状态。注：常用的稀释比例为1:4、1:6、1:8，可根据实验具体情况调整稀释比例。(c)取60&micr...

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PCR是怎样完成扩增的呢?

PCR是怎样完成扩增的呢?PCR是聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction），实验过程是利用一段DNA为模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物的共同参与下，将该段DNA扩增至足够的数量，以便进行结构和功能的分析。若我们想要分析/探索基因的遗传信息，则需要大量的DNA片段，例如动物的组织；凶手的毛发、血液、皮肤；古生物；历史残骸；患者的组织等，可能只能分离出少量的DNA，若想研究其遗传信息，有着很大的阻碍和困难，在1985年，出现了一种方法：可以在短时间内大量复...

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【开学巨惠】开学“剂”，科研装备换新正当时！

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